polimeráz-láncreakció
(PCR, polymerase chain reaction)
DNS enzimatikus amplifikálására (másolatok megsokszorozására) szolgáló molekuláris biológiai technológia.
Lehetővé teszi a DNS egy rövid, jól definiált, általában legfeljebb 10.000 bázispárból (10 kbp) álló szakaszának amplifikálását.
Általánosan használt módszer különböző kutatási és egészségügyi célokra (például örökletes betegségek kimutatására, genetikai azonosításra, fertőző betegségek diagnosztizálására).
A folyamat alapvető komponensei:
DNS-templát (a DNS-szakasz amplifikálandó régiójával)
Két primer (az amplifikálandó szakasz elejéről és végéről, rövid, általában 18-25 nukleotidból álló mesterséges DNS-szál)
DNS-polimeráz enzim (lemásolja az amplifikálandó szakaszt)
Nukleotidok (amelyekből a DNS-polimeráz felépíti a másolat DNS-eket)
Puffer (a folyamathoz megfelelő kémiai környezet biztosítására)
A folyamat egy PCR-készülékben (kép) történik, automatikusan.
A reakció lépéseihez pontosan megállapított hőmérsékletekre melegíti és hűti a reakciócsöveket, ciklikusan.
Az eljárás során 20-30-szor ismétlődik a három ciklus.
Minden ciklusban megduplázódnak a DNS-szálak.
Utána gél-elektroforézissel határozzák meg a génsorrendet.